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細說《歐洲藥典》中『培養(yǎng)法』支原體檢測

更新時間:2023-03-12  |  點擊率:572

近些年來,生物醫(yī)藥行業(yè)發(fā)展迅速,細胞治療、抗體藥物治療成為研究熱門。隨之而來生物制品安全控制,成為相關從業(yè)者關注的焦點。


支原體因其隱蔽性高、分布廣泛的特點,一直以來,在檢測方面存在著困難。但對于涉及細胞培養(yǎng)的生物制品等工藝過程,支原體檢測勢在必行。各國藥典中,都對相關生物制品的支原體檢測做出了規(guī)定。本期內(nèi)容,我們就來詳細講講,《歐洲藥典》中支原體檢測方法——培養(yǎng)法。

《歐洲藥典》中,對于培養(yǎng)法有許多限制與規(guī)定,總結(jié)為如下幾點:

1、確保在所選擇的培養(yǎng)條件下可能存在于待檢測產(chǎn)品中的少量支原體生長

2、液體介質(zhì)必須含有酚紅。

3、所選擇的培養(yǎng)基范圍至少能滿足以下幾種微生物生長的營養(yǎng)需求,即滿足測試菌株的生長條件,對每一批新培養(yǎng)基進行營養(yǎng)特性測試。


培養(yǎng)條件如下:

液體培養(yǎng):在35-38°C的密封容器中培養(yǎng)。

固體培養(yǎng):在35-38°C的微親氧條件下(含5- 10%二氧化碳的氮氣和足夠的濕度以防止瓊脂表面干燥)培養(yǎng)。


《歐洲藥典》中規(guī)定,支原體培養(yǎng)法檢測,所用的需要進行營養(yǎng)特性實驗(特異性驗證)、抑制物質(zhì)實驗(耐用性)的驗證,才有說服力。


另外,待檢測的樣品也需要進行一定處理。

從實驗原理看,培養(yǎng)法檢測支原體有以下特點:

優(yōu)點:靈敏度高

缺點:只能檢測活的支原體


藥典中提到,經(jīng)過驗證,NAT法可以替代培養(yǎng)法進行支原體檢測。


德國MB的支原體qPCR檢測試劑盒:Venor®Gem qEP,通過《歐洲藥典》方法學驗證,涵蓋培養(yǎng)法的同時,規(guī)避其短板。


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