欧美大屁股眼子xxxxx视频,玩弄老年妇女过程,农村肥bwbwbwbwbw,3d动漫精品啪啪一区二区免费

當前位置:首頁  >  技術文章  >  用qPCR檢測支原體,這3個關鍵點要注意!

用qPCR檢測支原體,這3個關鍵點要注意!

更新時間:2023-05-01  |  點擊率:630

實時定量聚合酶鏈式反應(qPCR)是一種高靈敏度、高精確度的分子生物學技術,用于檢測和量化DNA或RNA的數(shù)量。該項技術已經(jīng)廣泛用于生物相關行業(yè)的檢測項目中,其中就包括支原體檢測。


我們都知道,支原體污染對于細胞相關的臨床項目危害巨大,支原體檢測是項目申報的必要環(huán)節(jié)。實現(xiàn)檢測的高靈敏度、高特異性,并盡可能縮短實驗時間,是非常有意義的。


藥典方法中,培養(yǎng)法和指示細胞法都各有缺點,而qPCR方法兼顧了二者的優(yōu)點,受到眾多從業(yè)人員的青睞。那么在實驗過程中,有哪些注意事項?本期內(nèi)容,以德國Minerva Biolabs公司生產(chǎn)的Venor Gem qEP為例,盤點qPCR檢測支原體的關鍵點。


Venor Gem qEP試劑盒能檢測多種支原體、靈敏度高、遵循歐洲藥典流程要求。


圖片




  Part.01 樣品處理

一般來說,該試劑盒適用于細胞、細胞培養(yǎng)上清等物質(zhì)的支原體檢測。


當細胞長至80%-90%時,收集樣品。此時可對樣品進行95℃的孵育處理。


需要注意的是:細胞培養(yǎng)產(chǎn)物中可能存在PCR抑制物質(zhì),例如:細胞顆粒、較大的樣品體積或其他生物材料(疫苗、石蠟包埋樣品等)、胎牛血清含量>5%等情況,需要在進行PCR之前,對樣品進行DNA提取處理,以盡可能減輕無關因素對實驗結(jié)果的干擾。


這里推薦試用配套的德國MB支原體提取試劑盒:


圖片


有小伙伴可能會產(chǎn)生疑問:培養(yǎng)基中的青霉素或者鏈霉素,會不會對實驗結(jié)果產(chǎn)生影響?


就目前有記錄的研究結(jié)果而言,沒有發(fā)現(xiàn)常用的“雙抗"會對檢測的靈敏度等造成影響。




Part.02 反應體系建立  




圖片
圖片


在進行支原體qPCR檢測時,需要設置合適的反應體系和條件。反應體系包括Mix、樣品DNA、緩沖液、內(nèi)控等組分。反應條件包括擴增溫度、時間、周期數(shù)和熒光信號閾值等參數(shù)。


需要注意的是:需嚴格按照使用說明中的參數(shù)進行設置。隨意更改數(shù)值可能會影響檢測結(jié)果的準確性。




  Part.03 結(jié)果解釋

圖片
圖片
圖片




FAM通道:檢測支原體熒光信號。

HEX通道:檢測內(nèi)控對照熒光信號。


需要注意的是:支原體DNA和內(nèi)控DNA存在信號的競爭性抑制。支原體DNA越多,F(xiàn)AM通道信號越高,檢測內(nèi)控對照的HEX通道信號越低。


定量需基于Ct值和DNA標準曲線。

Ct<40為陽性結(jié)果。Ct≥40為陰性結(jié)果。




前女友黑化日常| 小浪货腿张开水好多啊学生视频| 欧美a一片xxxx片与善交| 校花玉腿缠腰娇喘迎合| 宿舍玩弄六个女同学高txt| www.五月天| 亚洲乱码精品久久久久..| 人妻厨房出轨上司hd院线波多野 | 精品久久久久久中文字幕大豆网 | igao视频网在线观看| jizzjizz欧美69巨大| 中文字幕一区二区人妻| 国模杨依粉嫩蝴蝶150p| 偷窥学校女厕撒尿bbbbb| japanese极品丰满少妇| a片在线观看免费| 一炕四女被窝交换啪啪| 中文av人妻av无码中文视频| 国内精品卡一卡二卡三| 青青草原精品99久久精品66| 精品国产乱码久久久久久1区2区| 雯雯在工地被灌满精在线播放| 一 级 黄 色 片一录像厅| 国产精品一亚洲av日韩av欧 | 久久精品一区二区三区四区| 欧美成人少妇激情视频112| 无码熟妇人妻av在线影片软件 | 爱上黑道女友| 嫩模超大胆大尺度人体写真| 被学长抱进小树林c个爽| 日本xxxx| a片在线观看| 特级做a爰片毛片免费69| 里番acg里番成人本子| 御书屋御宅屋高辣h| 医生的玩弄h羞耻诊疗h| 全部删除看过的历史记录| 免费真人视频app| 国产乱妇无码大片在线观看| 老师在办公室被躁到高潮| 久久国产精品偷任你爽任你a|