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美國(guó)藥典關(guān)于FBS生長(zhǎng)促進(jìn)曲線的規(guī)定

更新時(shí)間:2017-07-31  |  點(diǎn)擊率:1782

  生長(zhǎng)促進(jìn)曲線的測(cè)定,是反映胎牛血清(FBS)功能的方法之一。下面締一生物/締一生物專家根據(jù)美國(guó)藥典的方法,簡(jiǎn)要描述一下美國(guó)藥典關(guān)于FBS生長(zhǎng)促進(jìn)曲線的規(guī)定。

 

美國(guó)藥典關(guān)于FBS生長(zhǎng)促進(jìn)曲線的規(guī)定

 

  細(xì)胞生長(zhǎng)速率的測(cè)定經(jīng)常用于確定細(xì)胞對(duì)外源刺激的反應(yīng)。定量評(píng)估細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況是用于監(jiān)測(cè)培養(yǎng)條件一致性的重要方法。細(xì)胞傳代的*濃度,*接種密度和倍增時(shí)間都是可被量化的指標(biāo),并可用于觀察趨勢(shì)。因此,了解細(xì)胞的生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)對(duì)于設(shè)計(jì)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)非常重要。而細(xì)胞生長(zhǎng)狀況在潛伏期、對(duì)數(shù)期和平臺(tái)期都存在不確定性,在這三個(gè)生長(zhǎng)階段記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀況,可用于確定細(xì)胞群體倍增時(shí)間和細(xì)胞周期。細(xì)胞進(jìn)入平臺(tái)期后可能降低生長(zhǎng)速率和改變形態(tài),發(fā)生極化和分泌更多的細(xì)胞外基質(zhì),使得細(xì)胞很難從基質(zhì)上分離下來,細(xì)胞在對(duì)數(shù)期后期的產(chǎn)量zui高,可重復(fù)性。

  前期細(xì)胞接種方法,請(qǐng)見文章《如何準(zhǔn)備用于生長(zhǎng)促進(jìn)曲線測(cè)定的細(xì)胞》。

  測(cè)定生長(zhǎng)促進(jìn)曲線,需在第0,1,2,3,4,7天進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。

  計(jì)算平均的活細(xì)胞數(shù)(貼壁cell/cm2或懸浮細(xì)胞/ml)和活力細(xì)胞百分比。用半對(duì)數(shù)坐標(biāo)制圖,活細(xì)胞數(shù)對(duì)數(shù)在Y軸,時(shí)間(天)在X軸。利用跨過3個(gè)或3個(gè)以上時(shí)間點(diǎn)的線性生長(zhǎng)曲線計(jì)算倍增時(shí)間。

  要計(jì)算可靠的倍增時(shí)間,截取的生長(zhǎng)曲線線性值R2應(yīng)≥0.98。待測(cè)樣本的倍增時(shí)間應(yīng)不少于美國(guó)藥典FBS參考標(biāo)準(zhǔn)品的90%。

  綜上所述,您是不是已經(jīng)對(duì)美國(guó)藥典關(guān)于FBS生長(zhǎng)促進(jìn)曲線的規(guī)定,有所了解。如果還有其他疑問,請(qǐng)咨詢締一生物/締一生物資深專家。

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